Линейный иммунный анализ, (ЛИА-XL)

ЛИНЕЙНЫЙ ИММУННЫЙ АНАЛИЗ (ЛИА) В ДИАГНОСТИКЕ АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Линейный иммунный анализ (LIA) — для качественного измерения аутоантител класса IgG (и/или IgА).

Линейный иммунный анализ ЛИА-MAXX (ANA-LIA Maxx 17 аутоантител) предназначен  для диагностики таких аутоиммунных заболеваний, как системная красная волчанка, синдром Шегрена, склеродермия, синдром CREST, смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ), первичный билиарный цирроз, миозит. С данными заболеваниями могут быть связаны гломерулонефрит, РА, поражения ЦНС (психоз), анемия, лейкопения, нейтропения, легочный фиброз, неонатальная волчанка, инсульты, вызванные васкулитом.

Антитела к антигену:	Аутоиммунное Заболевание	Клинические особенности
ds DNA (двухспиральная ДНК)	Системная Красная Волчанка (40-70%)	Риск развития волчаночного гломерулонефрита
Nucleosome ( нуклеосомы) «клеточный фактор LE»	84-88% СКВ.   ЛКВ СШ и СЗСТ  —  5-8%	Высокий риск развитие гломерулонефрита
Histone ( гистоны )	50-90%  ЛКВ 20-50%  спонтанная  СКВ Реже при ПБЦ,  РА, ССД, АИГ	При ЛКВ – нет антител к ds DNA Сходно с СКВ, плевропульмональные поражения и поражения суставов
SmD1	Подтверждает диагноз СКВ	Активная фаза, агрессивное течение, поражение ЦНС  и почек.
PCNA	2-5% больных СКВ	Высокая частота развития гломерулонефрита и тромбоцитопении
P0	10 – 20% больных СКВ	Сильное поражении ЦНС – развитие Волчаночного психоза
SS – A / Ro 60 kD	СКВ	Поражения легких, ЦНС, инсульты, вызванные васкулитом, почечная недостаточность
SS – A / Ro 52 kD	Первичный СШ	У матери на 18-30 нед.бер. – развитие неонатальной волчанки у плода (дерматомиозит, врожденная поперечная блокада сердца, поражение печени)
SS – B/ La	СШ ( часто при выраженных симптомах  Sicca)	Развитие васкулита, лимфоаденопатии, спленомегалии, анемии, лейкопении, нейтропении
CENP-B	CREST синдром (лимитированная склеродермия)	Кальциноз кожи, синдром Рейно, нарушение моторики пищевода, склеродактилия, телеангиэктазии
Scl-70	Прогрессирующая системная склеродермия	Усложненная форма, низкий уровень выживания с ранними и летальными поражениями почек и сердца
·   U1-snRNP(+) и SmD1(-)     ·   U1-snRNP(+) и SmD1(+) ·   U1-snRNP(+) и PM—Scl(+)	СЗСТ     СЗСТ разовьется в СКВ  СКД  и  ДМ/СКВ/СШ	Cиндром Рейна, артрит, акросклероз, отек рук, миозит и легочная гипертензия.   Гломерулонефрит Перекрестный синдром
AMA M2	90 — 95%  Первичный Билиарный Цирроз	Холестаз, рубцевание, фиброз, цирроз и печеночная недостаточность
Jo-1	33%  первичный полимиозитом  25%  первичный дерматомиозит	«Синдром антисинтетазы»  —  синдром Рейна, полиартралгия или полиартрит, диспноэ. Интерстициальное заболевание легких
PM-Scl	Перекрестный синдром склеродермии — полимиозита	Язвы на подушечках пальцев и над костными выступами, контрактуры суставов, атрофия  мышц, фиброз легких.
Mi-2	10-15%  острый дерматомиозит	Артралгия, синдром Рейна, артрит, интерстициальное заболевание легких, но не сердечная недостаточность. Вероятность развития злокачественного поражения
Ku	Перекрестный синдромсклеродермии – полимиозита. Миозит	Артралгия, миозит, синдром Рейна. Легочная гипертензия на фоне ССД, при СКВ и первичном СШ.

Маркеры системных заболеваний:

1. ds DNA (двуспиральная ДНК)

• Антитела к ds DNA относятся к АЯА. С 1982 — один из 11 критериев системной красной волчанки (СКВ).
• Высокий риск развития волчаночного гломерулонефрита.
• «Kлеточный фактор LE».

2. Nucleosome (нуклеосомы)

• Антитела обнаруживаются у больных СКВ и ЛКВ.
• Развитие гломерулонефрита.

3. Histone (гистоны)

• Гистоны — основной класс нуклеопротеинов, необходимых для сборки и упаковки нитей ДНК в хромосомы.
• Маркер для дифференциальной диагностики СКВ И ЛКВ
• Также можно обнаружить у больных первичным билиарным циррозом, РА, склеродермией, аутоиммунным гепатитом.

4. SmD1

• Антиген Sm состоит из 9 различных полипептидов – белков snRNPs. Главная цель для антител — белок D1.
• Активная фаза заболевания, более агрессивное течение с поражением ЦНС и почек.

5. PCNA — proliferation cell nuclear antigen

• Ядерный антиген пролиферирующих клеток — вспомогательный фактор ДНК-полимеразы во время репликации и репарации ДНК.
• У 2-5% больных СКВ, но является важным клиническим маркером, так как наличие антител связанно с высокой частотой развития гломерулонефрита и тромбоцитопении.

6. P0 — ribosomal P phosphoproteins

• Обнаруживаются у 10–20% больных СКВ.
• При сильном поражении ЦНС – развитие волчаночного психоза.
• Повышение концентрации антител коррелирует с эпизодами психоза.

Таким образом, маркеры системной красной волчанки:

• Nucleosome – появляются значительно раньше, чем к ds DNA – более чувствительный маркер.
• ds DNA — активная фаза, высокий риск развития волчаночного гломерулонефрита.
• Histone — для дифференциальной диагностики СКВ И ЛКВ: обнаруживаются у 50-90% больных ЛКВ, при этом отсутствуют антитела к ds DNA.
• SmD1 — активная фаза заболевания, более агрессивное течение, поражение ЦНС и почек.
• P0 — при сильном поражении ЦНС – развитие волчаночного психоза.
• PCNA — с высокой частотой развития гломерулонефрита и тромбоцитопении.

Маркеры синдрома Шегрена:

1. SS–A / Ro 60 kD и SS–A / Ro 52 kD

• Антитела только к SS–A / Ro 60 kD обнаруживаются у больных СКВ (около 13%) с выраженной симптоматикой фотосенситивных кожных проявлений — «бабочка».
• Антитела только к SS–A / Ro 52 kD обнаруживаются у больных первичным СШ.
• Антитела к обоим протеинам образуются у больных СКВ и вторичном синдроме Шегрена.
• Поражения легких, ЦНС, инсульты, вызванные васкулитом, почечная недостаточность.

2. SS–B / La

• SS-B/La антиген является рибонуклеопротеином.
• При длительном заболевании СКВ во время активной фазы у 50-60% больных антитела к SS–В способствуют развитию нейтропении.
• Антитела к dsDNA и белкам Р также могут способствовать нейтропении.

Маркеры склеродермии:

1. CENP-B — Centromere protein B

• Высокоспецифичный маркер CREST-синдрома и лимитированной склеродермии: у 80-90% больных CREST были обнаружены антитела к CENP-B, в то время как у людей с ревматоидными болезнями, не имеющими отношения к CREST, анализ на антитела был отрицательным.

Антитела прогнозируют типичные проявления синдрома СREST, такие как:

• Синдром Рейна с поражением пальцев и лица и только через длительное время (до 10 лет) — поражение внутренних органов.

2. Scl-70 (scleroderma 70 kD)

• Показатель диффузной и прогрессирующей системной склеродермии, специфичность 90-100%.
• У больных с антителами к Scl-70 наблюдается низкий уровень выживания с ранними и летальными поражениями почек и сердца.

Смешанное заболевание соединительной ткани:

1. U1-snRNP (small nuclear ribonucleoprotein complex)

Если обнаружены антитела:

• Только к U1-snRNP и отрицательно к SmD1 – указывает на СЗСТ, с классическими клиническими проявлениями заболевания (синдром Рейна, артрит, акросклероз, отек рук, миозит и легочная гипертензия).
• И к U1-snRNP, и к SmD1 (или другие антитела СКВ) – классический СЗСТ разовьется в СКВ. Маркер нефрита, существующего или развивающегося. У 30-40% больных СКВ антитела образуются задолго до клинического проявления.
• К U1-snRNP и PM-Scl — перекрестный синдром: системная склеродерма и ДМ/СКВ/СШ.
• Сильная корреляция с болезнью легких и гломерулонефритом.

Первичный билиарный цирроз:

1. AMA M2 (anti-mitochondrial antibodies)

• Высокоспецифичный маркер (90 — 95%) первичного билиарного цирроза.
• У больных ПБЦ активированные Т-лимфоциты атакуют и разрушают эпителиальные клетки мелких желчных протоков, где экспрессия гена M2 происходит в больших количествах.
• Из-за поврежденных желчных протоков происходит застой желчи в печени (холестаз), что приводит к рубцеванию, фиброзу, циррозу и печеночной недостаточности.
• Высокий уровень ГГТ (GGT) подтверждает диагноз.

Миозит:

1. Jo-1

• Маркер миозита и интерстициального заболевания легких.
• Антитела к Jo-1 обнаружены у 33% больных с первичным полимиозитом и у 25% с первичным дерматомиозитом.
• Часто при отсутствии основных ANA.
• Высока вероятность развития полимиозита в хроническую и деформирующую форму заболевания.
• Повышение уровня креатинкиназы подтверждает диагностику.

2. PM-Scl (polymyositis – scleroderma)

• Высокоспецифичный маркер перекрестного синдрома склеродермии — полимиозита (ДМ).
• Пациенты с анти -PM-Scl-антителами страдают язвами на подушечках пальцев и надкостными выступами, контрактурами суставов и атрофией мышц.
• 55% пациентов также имеют фиброз легких и рестриктивный легочный процесс. Наблюдается значительное повышение креатинкиназы, но очень редко поражение желудочно-кишечного тракта и почек.

3. Mi-2 (β)

• Антитела к Mi-2 находят у 10-15% больных с острым дерматомиозитом.
• Клинические проявления: артралгия, синдром Рейна, артрит, интерстициальное заболевание легких, но не сердечная недостаточность.
• При наличии антител к Mi-2 (β) высока вероятность развития злокачественного поражения, вызванного дерматомиозитом, и в дальнейшем рака (яичников, легких, поджелудочной железы, желудка, колоректального, лимфома нон-Ходжкин).

4. Ku

• Также антитела к Ku образуются при легочной гипертензии на фоне склеродермии, при СКВ и первичном СШ.
• Клинические проявления: артралгия, миозит, синдром Рейна.
• Антитела к Ku не связанны с развитием рака при дерматомиозите.
• Часто проявляются вместе с основными ANA (анти-Ro/SS-A, U1-snRNP).

Таким образом, представленные ЛИА-тесты могут использоваться для скрининга и ранней диагностики аутоиммунных заболеваний.